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采用 CRISPR/Cas9介导敲入技术构建
点击次数:1317 发布时间:2017-06-13

         采用 CRISPR/Cas9介导敲入技术构建可量化生产蛋白质的稳定细胞系

从植物标本中提取的DNA是高度片段化的,因此提取短DNA分子的提取步骤非常严格。动物尸体DNA的提取方法和DNA文库制备方法的改进,已经能够有效提取小于50bp的DNA分子片段。因此,德国科学家Rafal M. Gutaker等将这些改进方法应用到植物标本的DNA提取,并通过测序评估提取性能,该方法能够对DNA片段长度的分布进行准确评估。与使用十六烷基*基溴化铵(CTAB)提取相比,使用N-笨甲酰溴(PTB)缓冲液提取的中间片段长度减少35%,改进DNA与硅膜的结合条件可以额外减少10%。他们并未观察到单链DNA长度的进一步降低和双链DNA文库的制备方法。这种方法能够从植物标本中提取超短分子,这将帮助开启储存在标本室的遗传信息。

 原文:

Rafal M. Gutaker , Ella Reiter , Anja Furtwängler . Extraction of ultrashort DNA

molecules from herbarium specimens. BioTechniques 62:76-79 (February 2017).

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