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核酸染料要怎么用?用的时候要注意些什么?
点击次数:2514 发布时间:2020-12-15
  核酸染料的机理是通过静电吸附与DNA分子结合,从而大大增加了DNA的发光。它的荧光信号强,背景低,不同于强效EB,毒性较低,使用更安全。双链DNA在透射的紫外线下显示绿色荧光,可用于RNA染色。激发波长分别为268m,294mm和491nm,前两种是紫外光,后者是可见光。发射波长在530nm处产生。
 

核酸染料

  核酸染料的使用方法:
  1、在微波炉中融化100m琼脂凝胶溶液(浓度通常为0.8%〜2)。
  2、加入2-5ul,并轻轻摇动以免产生气泡。
  3、冷却至不烫手时倒入凝胶,琼脂糖凝胶完全固化后,加载样品进行电泳。
  4、电泳完成后,使用可疑的凝胶成像系统或可见光透射仪进行观察。如果您使用可疑的凝胶成像系统拍照,则可以通过调节照明设备,曝光时间并选择合适的光片来获得清晰的图像和低背景的照片。
  核酸染料的注意事项:
  1、胶水的厚度不应超过0.5cm,胶水太厚会影响检测的灵敏度。
  2、琼脂凝胶的反复融化可能会影响核酸检测的灵敏度。
  3、当通过凝胶电泳回收DNA时,建议在自然光下进行染色和切割DNA谱带,以避免紫外线和EB对目标DNA的损害,这可以显着改善分子生物学的下游水平,例如作为克隆,转化和转录。
  4、对皮肤和眼睛有一定刺激性。操作时请戴手套。如果不小心触摸皮肤,则应立即清洗并正确处理废物。
  
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