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96孔板铺板的小技巧,您知道多少?
点击次数:897 发布时间:2021-04-08

      您是怎样对96孔板进行铺板的?当细胞用96孔板接种时,细胞经常是不均匀分布。第二天就会发现有些地方出现堆积性生长,而还有不少地方细胞则很稀疏,细胞密集的地方因细胞与细胞之间的接触抑制影响细胞的生长,这样就很难评价干预因素对细胞的作用。因此,将96孔板种均匀也是进行后续实验的前提,现将以前用的老办法和最后用的新方法比较一下,以让大家看看各自优缺。

  1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右摇动,然后来回摇动几次,但这种方法通常在2-3个细胞的5口井中分布不均匀。 在大多数情况下,中间的孔会出现成堆的分布,会让人感到一阵麻烦。 再一次,看到一位老师将电路板放在振动器上并摇动几分钟。 结果更糟。 细胞都在中间。

  通常,会在96孔板的每个孔上,加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后,与未加入的细胞悬浮液混合,然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后,用左手轻轻握住木板的左边,然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ,将剩下的三面逐一拍打,静置5分钟左右,然后放入37度的培养箱中。

  2、新方法:这种方法是非常好,非常均匀播种。使用等速吸引吸取细胞,然后吸移嘴对孔(注意尖不接触孔枪头底部)的侧壁上,然后再慢慢敲除细胞吸管定植后,不要摇晃板,它只是可以直接在显微镜下被放置,这个方法可以被说成是100%有效的。

  补充:从6孔板到96孔板,细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞,然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞时和之后,请勿移动能力培养板;如果在空气中没有介质吹入,但是不要移动培养板,加入细胞后,静置20-30分钟,然后可以将其移入培养箱。这样,细胞结构通常具有均匀生长。当然,前提是细胞消化系统良好。

 

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