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通过离心柱在溶液中进行叠氮-炔生物分子结合的异源催化
点击次数:2915 更新时间:2016-01-04

   通过离心柱在溶液中进行叠氮-炔生物分子结合的异源催化

   铜催化的叠氮-炔环加化学反应(简称CuAAC)应用广泛,尤其可以用于生物正交的结合反应中。美国洛杉矶Occidental学院的科学家Jeremy Kallick等利用可选择的活化的CuAAC开发了一种单管式、异源生物分子结合及纯化方法。二价铜前体在中性配位体1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮或阴离子配体4,7-二苯基-1,10-邻二氮杂菲-二磺酸和锌汞合金还原剂的离子交换基质下转化成活性的一价铜。将一价铜复合物加到商品化的微量离心柱的分子筛基质上,乙炔基标记的生物分子和叠氮配体的混合物流过柱子,得到纯净有效的生物分子结合物。这个方法可以应用于糖基化DNA寡核苷酸和香豆素染料标记的膜通透多肽(八个精氨酸)。

原文:

Jeremy Kallick, Sarah Harris, Andrew K. Udit, and Michael G. Hill,Heterogeneous catalysis for azide-alkyne bioconjugation in solution via spin column: Attachment of dyes and saccharides to peptides and DNA, BioTechniques 59:329-334 ( January 2016)