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激光捕获显微切割技术用于1型糖尿病的研究
点击次数:1757 发布时间:2016-08-01

     从胰腺细胞中提取RNA具有一定的挑战性,在这里,美国俄亥俄州立大学的科学家Robert Szulawski等提出一种可重复的方法,该方法可以从啮齿动物幼体胰腺细胞中获得充足的、高质量的RNA,用于体外表达研究。组织取自TLR3+/+和TLR3-/-的雌性非肥胖型糖尿病老鼠,该老鼠处于糖尿病前期阶段。组织经液氮冷冻后切片,将组织切片固定在高浓度的酒精溶液中,并用含酒精的甲酚紫溶液染色,再水化作用使得固定切片zui小化。激光显微切割系统Leica LMD6000 能够从外形上识别胰腺细胞,并从组织中捕获高浓度的胰腺RNA样品。用胰腺cDNA进行探针法实时定量PCR检测CXC趋化因子配体10,该配体是一种炎症标记物可用于鉴定1型糖尿病。这一方法可作为显微切割技术用于啮齿动物胰腺细胞的典型代表,采用此方法只需要少量的组织便可进行表达研究,且不需要进行RNA的预扩增。利用非肥胖型糖尿病老鼠作为动物模型对于1型糖尿病的研究具有直接意义。

原文:

    Robert Szulawski,Masato Nakazawa,Kelly D. McCall,Calvin B.L. James,and Frank L. Schwartz,Laser capture microdissection tailored to type 1 diabetes mellitus research,BioTechniques60: 293-298 (August 2016)     

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