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荧光定量服务都有哪些内容和要求?
点击次数:768 发布时间:2020-09-24
  在PCR扩增中,添加了一对引物和特异性荧光探针。该探针是线性寡核苷酸,其两端分别标记有荧光报告基团和荧光猝灭基团。探针完成后,报告基团发出的荧光信号被淬灭基团吸收,无法用PCR仪检测到。在PCR扩增过程中(延伸阶段),探针被Taq酶的5'-3'核酸外切酶活性消化并降解,从而使报告荧光团和淬灭荧光团分离,从而使荧光监测系统能够接收到荧光。信号,即每个扩增的DNA链,都有一个荧光分子形成,从而使荧光信号的积累与PCR产物的形成完全同步,这是荧光定量服务的基础。那么它服务的内容和要求是什么?
 

荧光定量服务

  一、服务内容:
  1、从动物细胞,人或动物组织中提取核酸;
  2、分析核酸的浓度和纯度;
  3、荧光定量服务PCR检测;
  (1)引物和探针的设计与合成;
  (2)定量和相对定量的选择;
  (3)探针法和染料法的选择;
  (4)通过荧光定量PCR检测目标基因;
  (5)数据统计分析;
  4、实验前服务:根据客户提供的目标基因序列或NCBI序列号提供客户引物和探针,并选择引物和探针;
  5、正式实验服务:根据初步实验中选择的引物和探针,通过荧光定量PCR检测样品,并对结果进行统计分析。
  二、荧光定量服务要求:
  1、请提供尽可能多的新鲜材料(各种材料的RNA提取量请参考“总RNA提取”),或直接提供纯化的总RNA(大于5ug/样品);(有关各种材料的DNA提取量,请参阅“DNA提取”),或直接提供纯化的DNA(大于5ug/样品)。
  2、请通过电子邮件提供已知的全长基因序列。
  3、请提供尽可能详细的背景信息:DNA/RNA来源,丰度等。
 
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